Упрощенная HTML-версия
Приготовление мазка.
Пробирку с чистой культурой берут в левую руку
таким образом, чтобы была хорошо видна поверхность питательной среды с
выросшей на ней культурой. В правую руку берут бактериологическую петлю
так, как держат карандаш, и прокаливают ее в пламени горелки. Затем, не
выпуская петли, мизинцем и безымянным пальцем правой руки прижимают
ватную пробку к ладони и держат так во время последующих манипуляций.
Края открытой пробки обжигают в пламени горелки, вводят в нее петлю и берут
небольшое количество микробной массы. Горлышко пробирки снова обжигают,
слегка обжигают пробку и закрывают ею пробирку, а микробную массу
перенося! в каплю воды на обезжиренном предметном стекле. Не следует
вносить много культуры, капля должна слегка стать мутной. Остаток микробной
массы на петле сразу же сжигают в пламени горелки. Из капли с внесенной
культурой готовят мазок, равномерно размазывая ее петлей на площади 2-4 см".
Фиксация препарата.
После высушивания приступают к фиксации
препарата. Фиксация имеет целью: 1) убить микроорганизмы, 2) обеспечить их
лучшее прилипание к стеклу и, тем самым, предохранить препарат от смывания,
3) сделать мазок более восприимчивым к окраске, т.к. мертвые клетки лучше
красятся, чем живые.
Для фиксации чаще всего используется высокая температура. С этой
целью захватывают предметное стекло мазком вверх пинцетом и 3 раза проводят
через пламя горелки. Нельзя перегревать мазок: клетки микроорганизмов могут
деформироваться! Хороший мазок после сушки
должен давать на предметном стекле еле заметный налет. Перед окраской
препарат охлаждают.
Окраска препарата.
Существует позитивный и негативный способы
окраски. При позитивном способе окраски окрашиваются клетки
микроорганизмов. При негативном контрастировании краситель заполняет
пространство, окружающее клетки, в результате чего микроорганизмы, в
которые краситель проникает, выглядят как светлые частицы на равномерно
окрашенном поле. Для простого позитивного окрашивания клеток