Упрощенная HTML-версия
5.
Дефектные формы бактерий.
6.
Жгутики и реснички. Их строение, функции и методы выявления.
7.
Споры. Их роль и особенности строения. Спорообразование. Методы
выявления спор.
Сложные методы окраски препарата.
При дифференциации микробных
клеток, различающихся структурой клеточных стенок, используется сложный
метод окраски - окраска по Граму (по имени датского ученого).
При окраске по Граму все бактерии делятся на две группы:
грамположительные и грамотрицательные.
У грамположительных бактерий толщина клеточной стенки составляет
15-80 нм, состоит из пептидогликана, липидов, тейховых кислот. Большое
содержание пептидогликана обеспечивает при окраске по Граму образование
комплекса с генциановым фиолетовым и йодом, устойчивого к спирту,
вследствие чего они окрашены в сине-фиолетовый цвет.
Толщина клеточной стенки грамотрицательных бактерий 10-15 нм,
структура ее значительно сложнее. Основу ее составляют ориентировочные
внутренние липиды, которые с поверхностно расположенными полисахаридами
образуют липополисахаридный слой. На поверхности клеточной стенки
мозаично расположены белки и полисахариды. Пептидогликан представлен
одним слоем. Из-за большого содержания липидов клеточная стенка
грамотрицательных бактерий при окраске по Граму образует с генциановым
фиолетовым и йодом комплекс, разрушаемый при обработке спиртом,
вследствие чего клетки окрашиваются в розовый цвет.
Окраска по Граму осуществляется следующим образом:
1.
Окрашивают мазки генциановым фиолетовым. На препарат наносят
достаточное количество красителя, выдерживают 1-2 мин, краситель
сливают, не промывая водой.
2.
Далее обрабатывают мазки раствором Люголя до почернения (1-2 мин).