Упрощенная HTML-версия
Культуры клеток
Культуры клеток готовят из тканей животных и человека. Культуры
подразделяют на первичные (неперевиваемые), полуперевиваемые и
перевиваемые.
Приготовление первичной культуры клеток складывается из нескольких
последовательных этапов: измельчения ткани, разъединения клеток путем
трипсинизации, отмывания полученной однородной суспензии изолированных
клеток от трипсина, с последующим суспендированием клеток в питательной
среде, обеспечивающей их рост, например в среде № 199 с добавлением
телячьей сыворотки крови. Первичными являются клетки эпителиальных и
соединительных тканей абортивного материала человека и животных.
К полуперевиваемым культурам относятся диплоидные клетки человека.
Они представляют собой клеточную систему, сохраняющую в процессе 50
пассажей (до года) диплоидный набор хромосом.
Перевиваемые однослойные культуры клеток приготавливают из
злокачественных и нормальных линий клеток, обладающих способностью
длительно размножаться in vitro в определенных условиях. К таким культурам
относятся злокачественные клетки Hela, первоначально выделенные из
карциномы шейки матки, Hep-3, а также нормальные клетки амниона человека,
почек обезьяны и т.д.
О размножении (репродукции) вирусов в культуре клеток судят по
цитопатическому действию (ЦПД), которое может быть обнаружено
микроскопически и характеризуется морфологическим изменением клеток.
Вирусные частицы, освобождающиеся при разрушении одних клеток,
инфицируют другие, которые через некоторое время также погибают. В
результате вместо сплошного клеточного монослоя остаются лишь отдельные
клеточные островки.
Характер ПЦД, вызванного разными вирусами неодинаков. При
репродукции одних вирусов (парамиксовирусы, герпесвирусы), наблюдается